Já se sabe que o desequilíbrio da microbiota está implicado na obesidade, na resistência à insulina e no excesso de triglicéridos ou de colesterol... todos estes constituindo fatores de risco de diabetes e de doenças cardiovasculares. 

Se as pessoas que sofreram de doença de Cushing, uma patologia causada por um tumor benigno da glândula pituitária, têm um risco cardiometabólico mais elevado, mesmo vários anos depois de terem entrado em remissão, poderá isso dever-se também à disbiose?

Comparar os dados com os de mulheres saudáveis

Para responder a esta pergunta, uma equipa de investigadores espanhóis recrutou 28 mulheres com menos de 60 anos que tinham sofrido de doença de Cushing¹. Todas elas se encontravam em remissão há mais de 5 anos.

Recolheram-lhes as fezes para analisar a respetiva microbiota e amostras de sangue para nelas medirem vários parâmetros de risco cardiovascular. Analisaram também a distribuição da gordura corporal nessas mulheres. 

Estes dados foram comparados com os de um grupo de controlo de 25 mulheres saudáveis com a mesma idade e constituição física (IMC (sidenote: Índice de Massa Corporal (IMC) IMC o Índice de Massa Corporal avalia a corpulência de uma pessoa, estimando a massa gorda do corpo com recurso ao cálculo da relação entre o peso (kg) e a altura elevada ao quadrado (m2) da pessoa. https://www.nhlbi.nih.gov/health/educational/lose_wt/BMI/bmicalc.htm https://www.euro.who.int/en/health-topics/disease-prevention/nutrition/a-healthy-lifestyle/body-mass-index-bmi ) ).

O que mostram os resultados?

Diferenças evidentes o nível da microbiota

Como era de esperar, as mulheres em remissão apresentaram vários fatores de risco cardiovascular em comparação com as voluntárias saudáveis: mais gordura abdominal, níveis mais elevados de hemoglobina glicada, triglicéridos e glicose em jejum, menos colesterol "bom" (HDL), etc.

Paralelamente, todas apresentavam uma disbiose intestinal significativa. Não só a sua microbiota surgiu menos rica e diversificada, como também tinha uma estrutura muito diferente. 

Por exemplo, a estirpe Suturella, que estava ausente no grupo de controlo, surgiu presente em abundância nas mulheres do grupo da doença de Cushing. Ora, há diversos estudos referem a presença desta bactéria em pessoas que sofrem de diabetes, obesidade, excesso de insulina, aterosclerose, etc.

A persistência de perturbações metabólicas nas ex-doentes de Cushing pode estar ligada à disbiose

Facto surpreendente: nas antigas doentes, o índice que mede a diversidade bacteriana surgiu associado aos níveis de fibrinogénio, uma proteína envolvida na coagulação e, por conseguinte, ligada ao risco de acidente vascular. E esse índice mostrou-se inversamente correlacionado com os triglicéridos, a glicémia e os níveis de insulina. 

Isto sugere que a persistência de perturbações metabólicas nas antigas doentes de Cushing está muito provavelmente ligada à disbiose.

Esta é a primeira vez que tal ligação foi cientificamente demonstrada.

Tais resultados têm ainda de ser confirmados por estudos de maior escala. No entanto, eles sugerem a possibilidade de um dia se poder vir a intervir especificamente – recorrendo a probióticos ou ao transplante de microbiota fecal (TMF) – para reequilibrar a microbiota de pessoas que sofrem da doença de Cushing. 

Recompensa: a possibilidade de ganhar vários anos de vida saudável!

O que é que têm em comum o Papa S. João Paulo II, o ator Michael J. Fox (o Marty Mc Fly de Regresso ao Futuro) e o pugilista Muhammad Ali? Todos foram afetados pela doença de Parkinson, uma doença degenerativa cerebral reconhecível em particular pelos tremores que causa. Mas estas celebridades, tal como os quase 9 milhões de pessoas vítimas desta doença em todo o mundo, provavelmente têm também em comum uma bactéria chamada Desulfovibrio. Ou, mais precisamente, um excesso desta bactéria, que se pensa estar presente em quantidades (demasiado?) elevadas nas pessoas com a doença de Parkinson, sobretudo nas que desenvolvem formas graves da mesma. 

Das bactérias aos agregados cerebrais

Será que são essas bactérias as culpadas pela doença? Sim, a acreditar nos resultados publicados em 2023 por uma equipa finlandesa. Os seus trabalhos consistiram em sacrificar alguns nemátodos – vermes redondos e delgados – e, mais especificamente, dos designados C. elegans, que foram alimentados com bactérias Desulfovibrio extraídas quer das fezes de doentes de Parkinson quer das fezes dos respetivos cônjuges saudáveis. Conclusão: os vermes que ingeriram bactérias Desulfovibrio dos doentes de Parkinson desenvolveram mais (em termos numéricos) agregados proteicos típicos da doença nos seus cérebros, e agregados maiores (em termos de volume) do que os vermes alimentados com bactérias Desulfovibrio recolhidas das fezes dos respectivos cônjuges. Por outras palavras, as estirpes de bactérias Desulfovibrio, em particular as provenientes de doentes, favorecem a acumulação de agregados.

Mortalidade acrescida

E não é tudo! Os vermes alimentados com bactérias Desulfovibrio de pacientes morrem mais passados 4 dias. Esse excesso de mortalidade poderá ser explicado pela maior virulência das bactérias retiradas deles.

Esta descoberta suscita uma esperança imensa: não só os doentes de Parkinson poderão ser rastreados através do rastreio da bactéria em causa nas suas fezes, como também será provavelmente possível, um dia, controlar ou mesmo prevenir a doença, erradicando ou simplesmente limitando o número destas bactérias patogénicas.

Na doença de Parkinson, a acumulação de proteínas alfa-sinucleína sob a forma de corpos de Lewy é detetada não só no cérebro, mas também em vários outros tecidos e órgãos (medula espinal, nervos autónomos, tecido do miocárdio, etc.), inclusivamente no aparelho digestivo humano. Alguns cientistas suspeitam que a bactéria Desulfovibrio, que é mais frequente e mais abundante nas pessoas que sofrem de Parkinson (sobretudo nas formas graves), está envolvida na formação destes agregados intestinais, que se propagam através do nervo vago até ao cérebro como um prião (sidenote: Prião Os priões são agentes infeciosos compostos por proteínas, associados a formas específicas de doenças neurodegenerativas. Por exemplo, a encefalopatia espongiforme bovina (BSE ou "doença das vacas loucas") é uma doença priónica que afeta os bovinos, tendo como corolário a sua variante humana, a doença de Creutzfeldt-Jakob (DCJ).

Fonte: https://www.who.int/fr/news-room/fact-sheets/detail/food-safety ) . Mas será que estas bactérias, conhecidas pela sua capacidade de produzir sulfureto de hidrogénio (H₂S), são realmente capazes de o fazer? Foi isso o que pretendeu verificar um estudo finlandês que utilizou animais e, mais especificamente, um modelo de nemátodo (C. elegans) que exprime a alfa-sinucleína humana.

10 pacientes, 10 cônjuges e nemátodos

Foram isoladas três estirpes (D. desulfuricans, D. fairfieldensis e D. piger) de Desulfovibrio das amostras fecais de 10 doentes de Parkinson de uma clínica na Finlândia e dos respetivos 10 cônjuges saudáveis. Estas bactérias foram utilizadas para alimentar os nemátodos. Simultaneamente, outros vermes foram alimentados com Escherichia coli MC4100 que produz proteína curli, uma fibra amiloide que facilita a agregação de alfa-sinucleína (controlo positivo). E um grupo final de vermes recebeu uma dieta contendo E. coli LSR11, incapaz de produzir proteína curli (controlo negativo).

^{Fonte (sidenote: https://www.who.int/news-room/fact-sheets/detail/parkinson-disease )}

Efeito nos agregados cerebrais

A observação de secções da cabeça dos vermes mostrou que todas as 3 estirpes de Desulfovibrio induziram agregados nas cabeças dos vermes. Os vermes oriundos das fezes dos doentes de Parkinson pareceram ser "mais eficazes" do que os dos seus cônjuges saudáveis: os vermes possuíam mais agregados (em número) e agregados maiores (em volume). Além disso, os vermes alimentados com D. desulfuricans e, em menor grau, com D. fairfieldensis apresentavam agregados de alfa-sinucleína significativamente maiores do que os vermes alimentados com D. piger.

Efeito na mortalidade

Quanto à sobrevivência, após 4 dias, a mortalidade foi maior no grupo de vermes alimentados com Desulfovibrio dos pacientes com Parkinson. Este aumento da mortalidade poderia ser explicado pela maior virulência das suas bactérias, resultando numa maior toxicidade e num maior número de agregados, atingindo níveis letais. Na opinião dos autores, o aumento da virulência das estirpes provenientes de doentes de Parkinson pode dever-se à maior ou menor capacidade das Desulfovibrio de produzirem H₂S. De facto, o sulfureto de hidrogénio poderá estar envolvido na agregação da alfa-sinucleína, facilitando a libertação do citocromo c das mitocôndrias.

Todos os anos, dezenas de milhares de toneladas de antibióticos são utilizados no sector da saúde humana, animal e vegetal, parte dos quais sendo libertados no meio ambiente. É assim que é possível encontrar antibióticos nas águas residuais, mas também nos rios, nos mares e no solo, permitindo que as bactérias ambientais adquiram genes de resistência que podem ser transferidos para outras bactérias. Material genético e células bacterianas podem aerossolizar-se e, sob o efeito da turbulência do ar, subir para a atmosfera, viajar longas distâncias e passar a integrar o ciclo da água.

Prova da presença de um "resistoma" nas nuvens

Uma equipa de investigação franco-canadiana avaliou, na estação meteorológica de Puy-de Dôme, no Maciço Central, França, a uma altitude de 1.465 m, a quantidade de genes de resistência a antibióticos presentes nas nuvens. Foram recolhidas doze amostras através de aspirador de elevado desempenho entre setembro de 2019 e outubro de 2021, revelando uma concentração média de cerca de 5.400 de cópias de genes de resistência por m3 de ar (medição por citometria de fluxo). Os 33 genes de resistência selecionados correspondem aos principais antibióticos utilizados atualmente: quinolonas, sulfonamidas, tetraciclinas, aminoglicosídeos, glicopeptídeos, beta-lactâmicos e macrólidos. Destes, 29 foram detetados pelo menos uma vez e 6 foram observados em pelo menos 75% das amostras. 

A distribuição desses genes não variou de acordo com as estações do ano, mas sim de acordo com a origem geográfica das massas de ar. Os genes de resistência às quinolonas, antibióticos fortemente implicados na resistência aos antibióticos e cuja utilização tem sido restringida na Europa desde 2018, surgiram mais abundantes nas nuvens altas oceânicas. Os da resistência às sulfonamidas e às tetraciclinas detetaram-se maioritariamente nas nuvens formadas em superfícies continentais, talvez devido à sua utilização generalizada na criação de gado.

Atmosfera, uma via importante para a propagação do resistoma

Partindo do princípio de que a concentração média de genes de resistência transportados pelas nuvens é equivalente à encontrada neste estudo (5.400/m3 de ar), os investigadores calculam que as nuvens transportem permanentemente cerca de 2,53 × 1021 cópias de genes de resistência em todo o mundo. Assim, todos os anos, transitarão pelas nuvens entre 1,29 × 1025 e 2,06 × 1026 genes de resistência, com uma quantidade muito grande (2,2 × 1024) a cair de novo em terra sob a forma de precipitação (e uma fração a permanecer evaporada na atmosfera). 

Este estudo vem colocar em destaque a atmosfera como uma das vias através das quais os fatores de resistência aos antibióticos se espalham pelo mundo: estudos que permitam identificar as fontes de emissões bacterianas poderão vir a ajudar a limitar a sua dispersão². 

Infográficos para partilhar com seus pacientes

Rica em leguminosas (lentilhas, feijão, grão-de-bico, etc.), cereais integrais, frutas e verduras, frutos secos e sementes e azeite de oliveira, a dieta mediterrânica (sidenote: Dieta mediterrânea Rica em frutas, vegetais, cereais, oleaginosas (nozes) e peixe, e com baixo teor de carne vermelha, gorduras saturadas e laticínios. Lăcătușu CM, Grigorescu ED, Floria M, et al. The Mediterranean Diet: From an Environment-Driven Food Culture to an Emerging Medical Prescription. Int J Environ Res Public Health. 2019 Mar 15;16(6):942. ) caracteriza-se igualmente por um consumo moderado de peixe, aves e produtos lácteos e pelo baixo consumo de alimentos processados e de carne vermelha. Esta dieta particularmente virtuosa conduz a um consumo elevado de fibras alimentares e de compostos benéficos (nomeadamente os famosos polifenóis presentes nas uvas passas, nos frutos secos e nas azeitonas) e a um melhor equilíbrio das gorduras (menos ácidos gordos saturados). E, se os resultados de um estudo clínico recente servirem de base, há benefícios para a saúde dos seus adeptos, incluindo os pacientes que sofrem da (verdadeira) ferida (intestinal) conhecida como colite ulcerosa (sidenote: Colite ulcerosa A colite ulcerosa ou retocolite hemorrágica (RCH), também designada retocolite ulcerativa, é uma doença crónica do intestino grosso (cólon) caracterizada por inflamação (vermelhidão e inchaço) e ulcerações (feridas) ao longo do revestimento do cólon, que podem causar dor abdominal, cólicas, hemorragias e diarreia. Juntamente com a doença de Crohn, a colite ulcerosa faz parte das doenças inflamatórias crónicas do intestino (DICI) que afetam 10 milhões de pessoas em todo o mundo.(fonte: Fundação canadiana da saúde digestiva).     ) . E não se tratou de um estudo qualquer: um ensaio controlado (sidenote: Ensaio controlado Estudo no qual uma parte dos participantes recebe um placebo ou um produto conhecido (no caso os queques) para permitir a comparação. ) aleatório (sidenote: Ensaio aleatório Estudo no qual os produtos testados são distribuídos aleatoriamente (em inglês, random) entre os participantes. ) , o Santo Graal dos estudos que oferecem o melhor nível de provas de determinado efeito.

Atrasar o regresso das crises de colite ulcerosa

Em termos práticos, este estudo, realizado por investigadores da Universidade da Colúmbia Britânica (British Columbia), no Canadá, comparou os efeitos de uma dieta ocidental tradicional (pobre em frutas, verduras e leguminosas, rica em carne, etc.) com os de uma dieta mediterrânica em pacientes que sofrem de colite ulcerosa. E as conclusões? A dieta mediterrânica parece retardar o regresso das crises nos doentes em remissão e tornar as recaídas menos graves: observou-se uma ligeira retoma da doença em 1 de cada 3 doentes após 3 meses de dieta mediterrânica... enquanto quase metade dos doentes que mantiveram a sua dieta ocidental habitual apresentaram um regresso da doença com uma atividade ligeira a moderada.

_{Fontes (sidenote: Source : World Gastroenterology Organisation Global Guidelines, 2015 )}

Efeito protetor da microbiota intestinal 

Como se explica esse efeito de proteção? Pela microbiota intestinal, sem dúvida. A adoção da dieta mediterrânica foi acompanhada pela proliferação de bactérias protetoras que produzem mais ácidos gordos de cadeia curta (sidenote: Ácidos gordos de cadeia curta (AGCC) Os ácidos gordos de cadeia curta são uma fonte de energia (carburante) das células do indivíduo, interagem com o sistema imunitário e estão envolvidos na comunicação entre o intestino e o cérebro.   Silva YP, Bernardi A, Frozza RL. The Role of Short-Chain Fatty Acids From Gut Microbiota in Gut-Brain Communication. Front Endocrinol (Lausanne). 2020;11:25. ) , os quais favorecem a nossa saúde, e pelo recuo das bactérias potencialmente patogénicas. As secreções das membranas mucosas que revestem o intestino poderão estar envolvidas: reforçadas pela dieta mediterrânica, pensa-se que estas secreções impedem que as bactérias patogénicas cheguem ao epitélio intestinal.

Estes resultados incentivam os doentes que sofrem de colite ulcerosa a aproveitar os períodos de remissão da doença para adotarem uma dieta mediterrânica. Trata-se de uma ajuda alimentar que é bem tolerada durante essas fases de acalmia, mas que não deve, no entanto, levar à interrupção do tratamento médico!

Diarreia com sangue, dores abdominais, cólicas, tenesmo e fadiga: os sintomas da colite ulcerosa (ou retocolite hemorrágica) exercem um forte impacto na qualidade de vida dos doentes. Suspeita-se de uma alteração da microbiota intestinal. Ora esta microbiota é influenciada pela alimentação. Daí este ensaio aleatório controlado, realizado por investigadores clínicos da Universidade canadiana da Colúmbia Britânica (British Columbia), que estudaram a eficácia da dieta mediterrânica nos sintomas, na inflamação e na microbiota intestinal. Os adultos recrutados (65% de mulheres, com idade média de 47 anos) adotaram uma dieta mediterrânica durante 12 semanas, sob o aconselhamento de um nutricionista (15 pacientes), ou continuaram com a sua alimentação habitual (13 pacientes, grupo de controlo).

Prevenir a recaída da colite ulcerosa 

No final do estudo de 12 semanas, a dieta mediterrânica, bem tolerada, limitou o agravamento da atividade da doença: enquanto todos os doentes (exceto 1 na fase benigna) se encontravam em remissão aquando da respetiva inclusão, foi observada uma atividade ligeira em 1 de cada 3 doentes do grupo da dieta mediterrânica, enquanto quase 1 em cada 2 pacientes do grupo de controlo sofreu uma crise ligeira ou moderada. A calprotectina fecal, que permite prever uma recaída iminente e mede a inflamação intestinal, também testemunhou um efeito benéfico da dieta mediterrânica: 20% dos doentes submetidos a esta dieta apresentavam um nível de calprotectina fecal superior a 100 μg/g, em comparação com 75% dos do grupo de controlo.

Uma microbiota revista e corrigida

A análise da microbiota mostrou igualmente um impacto positivo da dieta mediterrânica, com um aumento da presença de bactérias associadas a um papel protetor, em particular Firmicutes (Ruminococcus spp., Flavonifractor spp., Clostridium M, Blautia A e Lactococcus spp.), e uma diminuição de bactérias potencialmente patogénicas como Veillonella dispar, Veillonella obetsuensis, Prevotella copri, Streptococcus australis e espécies formadoras de biofilmes. Os investigadores observaram também um aumento significativo das concentrações fecais de imunoglobulinas A secretoras (sIgA) após 12 semanas de dieta mediterrânica. Estas sIgA desempenham um papel essencial na manutenção da homeostase da mucosa: ligam-se às bactérias patogénicas e impedem-nas de atingir o epitélio intestinal. As SIgA poderão assim explicar a associação negativa entre os agentes patogénicos oportunistas e a dieta mediterrânica.

Mais ácidos gordos de cadeia curta

Por último, a adoção da dieta mediterrânica foi acompanhada por um aumento da produção de ácidos gordos de cadeia curta (AGCC), conhecidos pelas suas propriedades imunomoduladoras e por promoverem a homeostasia intestinal: aumento dos níveis de AGCC totais e dos ácidos butírico, acético e valérico.

Assim, a dieta mediterrânica, bem tolerada, parece constituir um padrão alimentar razoável e saudável que pode ser proposto aos doentes com colite ulcerosa em remissão para prevenir as recaídas, enquanto complemento do seu tratamento médico habitual.

A adaptação das bactérias no sentido de resistirem aos antibióticos constitui um fenómeno evolutivo natural. Mas o recurso maciço a este tipo de medicamentos para o tratamento de infeções humanas, animais e vegetais intensificou-a consideravelmente. E todos os anos, uma grande parte das toneladas de antibióticos que são utilizados é rejeitada para o meio ambiente: solos, rios, oceanos, etc. Aí, as bactérias resistentes conseguem desenvolver-se e transmitir os seus genes de resistência a outras bactérias, mas também têm a possibilidade de se dispersarem com o vento e atingir grandes altitudes. Embora a atmosfera não seja um ambiente adequado para a sua sobrevivência, os fragmentos e o material genético podem chegar às nuvens, viajar de um continente para outro e regressar ao nível do solo com a precipitação.

Nuvens aspiradas para tubos de ensaio

Na estação meteorológica de Puy-de-Dôme, situada a 1.465 m de altitude no Maciço Central francês, investigadores franco-canadianos recolheram 12 "amostras de nuvens" durante 2 anos usando um aspirador especial destinado a nuvens nimbus e cumulus. Em cada recolha, mediram a quantidade de bactérias e de 33 genes de resistência correspondentes aos principais antibióticos que são utilizados atualmente. Destes, 29 foram detetados pelo menos uma vez e 6 foram observados em pelo menos 75% das amostras. As nuvens continham uma média de 8.000 bactérias – principalmente de origem vegetal – das quais entre 5 e 50% poderiam estar vivas e potencialmente ativas, e mais de 20.000 cópias de genes de resistência a antibióticos por mililitro de água^1,2.

Os investigadores verificaram que a distribuição dos referidos genes variava em função da origem geográfica das massas de ar que serviram de amostra. Por exemplo, os genes de resistência às quinolonas, antibióticos cuja utilização tem sido limitada há vários anos devido à resistência aos antibióticos que promovem, eram mais abundantes nas nuvens altas oceânicas. Os genes de resistência às sulfonamidas e às tetraciclinas surgiram maioritariamente nas nuvens formadas em superfícies continentais, talvez devido à sua utilização generalizada na criação de gado.

Há reservatórios de genes de resistência aos antibióticos que sobrevoam as nossas cabeças 

Os investigadores extrapolaram as suas medições para o volume total de nuvens à volta da Terra, partindo do princípio que todas elas tinham a mesma concentração de genes de resistência a antibióticos. Resultados: todos os anos, cerca de 70 milhões de triliões (1024) destes genes transitarão através das nuvens, cerca de 3% dos quais podendo regressar à superfície da Terra. 

Este estudo vem colocar em destaque a atmosfera como uma das vias através das quais os fatores de resistência aos antibióticos se espalham pelo mundo: estudos que permitam identificar as fontes de emissões bacterianas poderão vir a ajudar a limitar a sua dispersão.